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超声波细胞破吉祥彩票注册网址平台 仪的常见问题及解决办法

发布日期:2019-07-19 16:01 来源:http://regearlearning.com 点击:

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超声波细胞破吉祥彩票注册网址平台 直接沉淀直接加入样品1b缓冲液,加入5ul巯基乙醇,混匀,离心,煮沸10min,直接加载,染色和脱色步骤如下:将胶水放入适量染色中在微波炉中液体1分钟(以下)可以进行适当的乙酸添加,并且可以在微波炉中用大量的水(自来水)代替染色溶液10分钟。

超声波系列的超声细胞破吉祥彩票注册网址平台 器在表达重组蛋白后超声破吉祥彩票注册网址平台 细胞,使用400w冰浴,破吉祥彩票注册网址平台 2s 1s,但在短时间内产生大量泡沫,影响破吉祥彩票注册网址平台 力量。 pbs和tris缓冲区都是这样的。它没有完全破吉祥彩票注册网址平台 ,我感兴趣的蛋白质就在这些完整的细胞中。


1.由于未设置探头位置,将生成气泡。探头必须靠近底部,大约1厘米(我通常距离底部0.5毫米)。功率会因仪器而异,但您可以观察液位,波动但不太强烈。

2.打破3S停止10S,打破二三十次看。

3.还要注意喇叭的位置。如果声音错误,应及时调整。另外,从细菌浓度的观点出发可以考虑。压吉祥彩票注册网址平台 时尽量增加体积,强度*不应超过60%。

4.尝试8s 8s。对于某些细菌蛋白质,您的方法很难散热,导致蛋白质变性产生气泡。 暂停时间稍长。这在包涵体的形式中更为常见。

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预处理通常是配置成一定浓度的细菌悬浮液。

使用超声波破坏时使用的具体条件是:

(1)取约的24h培养液,以5000r / min离心5min,收集细菌。

(2)用pH7.5的Na2HPO-NaH2PO缓冲液洗涤3次,然后用缓冲液制备1:3的细菌悬浮液。放在40

mL大型塑料试管。

(3)(超声波破吉祥彩票注册网址平台 机)将大塑料试管放入冰浴中,用超声波破吉祥彩票注册网址平台 (功率200W,1/2“探头,压吉祥彩票注册网址平台 30s,间歇30S)。

(4)将破吉祥彩票注册网址平台 的液体以12,000r / min的速度高速离心30分钟,收集细胞吉祥彩票注册网址平台 片和上清液。


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